ClodronateLiposomes巨噬細胞清除套裝

產品簡介：

清除巨噬(shi)細(xi)胞(bao)(depletion of macrophages)是研(yan)究巨噬(shi)細(xi)胞(bao)功能(neng)的重要方法(fa)。荷蘭(lan)阿姆斯(si)特(te)丹Vrije University 的Nico van Rooijen教授開發的一(yi)款Clodronate Liposomes，可以利用(yong)巨噬(shi)細(xi)胞(bao)的內(nei)(nei)吞(tun)機制(zhi)，將脂(zhi)質體(ti)包裹的膜不通(tong)透性的氯磷酸(clodronate)帶(dai)入細(xi)胞(bao)內(nei)(nei)，利用(yong)“特(te)洛伊木馬(ma)機制(zhi)”從而達到(dao)去(qu)除巨噬(shi)細(xi)胞(bao)的目的。

作用原理:

兩(liang)親性磷(lin)(lin)(lin)(lin)脂(zhi)分子(zi)在(zai)水(shui)中(zhong)可以(yi)(yi)形成(cheng)(cheng)同心圓(yuan)形式的(de)(de)磷(lin)(lin)(lin)(lin)脂(zhi)雙分子(zi)層球體(ti)，磷(lin)(lin)(lin)(lin)脂(zhi)雙分子(zi)層中(zhong)間(jian)通(tong)過水(shui)相分隔。溶(rong)解在(zai)水(shui)溶(rong)液中(zhong)的(de)(de)氯磷(lin)(lin)(lin)(lin)酸鹽(yan)在(zai)形成(cheng)(cheng)脂(zhi)質體(ti)的(de)(de)過程(cheng)中(zhong)被包裹進磷(lin)(lin)(lin)(lin)脂(zhi)雙分子(zi)層之間(jian)的(de)(de)水(shui)相中(zhong)(如圖1)。游離的(de)(de)氯磷(lin)(lin)(lin)(lin)酸鹽(yan)不能自由的(de)(de)通(tong)過脂(zhi)質體(ti)的(de)(de)磷(lin)(lin)(lin)(lin)脂(zhi)雙分子(zi)層。隨(sui)著脂(zhi)質體(ti)被巨噬(shi)(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)吞(tun)噬(shi)(shi)(shi)(shi)，在(zai)巨噬(shi)(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)溶(rong)酶體(ti)磷(lin)(lin)(lin)(lin)酸酶的(de)(de)作用下，溶(rong)解在(zai)脂(zhi)質體(ti)水(shui)相中(zhong)的(de)(de)氯磷(lin)(lin)(lin)(lin)酸鹽(yan)就可以(yi)(yi)被逐步釋(shi)放(fang)出來，并累積在(zai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)內，當其(qi)達到一定濃度(du)時(shi)，巨噬(shi)(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)將會受到不可逆轉的(de)(de)損傷，從(cong)而進入凋(diao)亡過程(cheng)。從(cong)死亡的(de)(de)巨噬(shi)(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)中(zhong)釋(shi)放(fang)出來的(de)(de)氯磷(lin)(lin)(lin)(lin)酸鹽(yan)在(zai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)外(wai)的(de)(de)半衰期(qi)極短(大(da)約15min)，可以(yi)(yi)通(tong)過泌尿系統排除體(ti)外(wai)。

CLODRONATE LIPOSOMES & CONTROL LIPOSOMES (PBS)

氯膦(lin)酸鹽(yan)脂(zhi)質體(ti)和(he)對照脂(zhi)質體(ti)（PBS）

SKU: CP-005-005

Category: Liposomal formulations

clodronateliposomes脂質體CP-005-005構(gou)成(cheng)：

氯膦酸鹽脂質體：

由同心磷脂雙(shuang)層(ceng)(ceng)構成(cheng)(cheng)的人造球，該雙(shuang)層(ceng)(ceng)包裹著含有氯膦(lin)酸鹽(yan)(yan)的PBS（磷酸鹽(yan)(yan)緩沖液(ye)）水溶液(ye)。脂質(zhi)體是(shi)顆(ke)粒，大小大。3微(wei)米。它(ta)們在(zai)PBS中(zhong)形成(cheng)(cheng)懸(xuan)浮(fu)液(ye)，在(zai)儲存(cun)時會沉淀(dian)，在(zai)試管或燒瓶的底(di)部形成(cheng)(cheng)沉淀(dian)。在(zai)對實驗(yan)動物給藥之(zhi)前，應先搖晃懸(xuan)浮(fu)液(ye)，以回收均勻的懸(xuan)浮(fu)液(ye)。

對照脂質體（PBS）：

對(dui)照(zhao)脂質體不含氯(lv)膦(lin)酸鹽。它(ta)們僅含有(you)PBS，可用于(yu)對(dui)照(zhao)實驗(yan)，以(yi)查(cha)明注射氯(lv)膦(lin)酸鹽脂質體后觀察到(dao)的效(xiao)果(guo)是否僅是由于(yu)巨(ju)噬細胞耗竭所致。

clodronateliposomes脂質體CP-005-005產品描(miao)述

磷(lin)脂(zhi)雙層由磷(lin)脂(zhi)酰膽堿和膽固醇組(zu)成。將所有脂(zhi)質體制劑懸浮在無菌磷(lin)酸鹽(yan)緩(huan)沖鹽(yan)水（PBS）中(zhong)：

– 10 mM的Na2HPO4；

– 10毫米NaH2PO4；

– 140毫(hao)米(mi)氯(lv)化鈉。

我(wo)們所有的(de)脂(zhi)質體(ti)均(jun)帶負電荷，因此(ci)不(bu)會一起阻(zu)塞。懸浮(fu)液中(zhong)的(de)脂(zhi)質體(ti)沒有大(da)小(xiao)，這意味著它也包含越來越大(da)的(de)脂(zhi)質體(ti)（大(da)3微米(mi)）。平均(jun)而言，脂(zhi)質體(ti)的(de)大(da)小(xiao)為1.7微米(mi)。

氯膦(lin)(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)脂(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)：人工(gong)制備的脂(zhi)質(zhi)囊泡(pao)的懸(xuan)浮(fu)液，包(bao)裹了氯膦(lin)(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)。懸(xuan)浮(fu)液中氯膦(lin)(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)的濃(nong)度約為。5毫克/毫升 氯膦(lin)(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)以CH2Na2Cl2O6P2·5 H2O的形式(shi)封裝在(zai)脂(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)囊泡(pao)中。

PBS脂質體：人工制備的(de)脂質囊泡(pao)的(de)懸浮液，其中(zhong)包裹了PBS水溶液。這(zhe)些(xie)不含氯(lv)膦(lin)酸(suan)鹽，可用于對照實驗。

熒光DiI脂質(zhi)(zhi)(zhi)體：人工制(zhi)備的(de)脂質(zhi)(zhi)(zhi)囊泡的(de)懸浮液，其(qi)中包封(feng)了PBS水溶液，并用熒光染料DiI標(biao)記。它們不含氯膦(lin)酸鹽，可用于研(yan)(yan)究通過特(te)定(ding)給藥途徑(jing)注射的(de)脂質(zhi)(zhi)(zhi)體是否(fou)能夠到達要研(yan)(yan)究的(de)巨噬細(xi)胞。

儲存和使用說明(ming)

到(dao)達(da)脂(zhi)質(zhi)體(ti)后，應將其儲存在4 – 8ºC（或39 – 47ºF）之間。脂(zhi)質(zhi)體(ti)懸浮液(ye)不得冷(leng)凍，也不要暴露于高溫下。這可(ke)(ke)能會(hui)對磷脂(zhi)雙(shuang)層造成干(gan)擾，可(ke)(ke)能導致氯膦酸鹽(yan)從(cong)脂(zhi)質(zhi)體(ti)中(zhong)泄漏(lou)出來。

給藥前，首先使(shi)脂(zhi)質(zhi)(zhi)體達(da)到(dao)室溫(wen)，然(ran)后輕輕搖動或攪拌懸(xuan)浮(fu)液。一(yi)段時(shi)間后，脂(zhi)質(zhi)(zhi)體易于沉淀，導(dao)致小瓶中的分布不均勻。當注(zhu)射(she)(she)花費太多時(shi)間時(shi)，脂(zhi)質(zhi)(zhi)體甚至可能在注(zhu)射(she)(she)器(qi)中沉淀。如果使(shi)用(yong)同一(yi)注(zhu)射(she)(she)器(qi)注(zhu)射(she)(she)多只(zhi)動物，可能會導(dao)致劑量不同。

不建議稀(xi)釋懸浮液，但(dan)如有必要，請(qing)使(shi)用PBS或鹽水(shui)。

我們(men)建(jian)議客戶在發貨后(hou)(hou)16周(zhou)內使用(yong)脂質(zhi)體制劑。強烈建(jian)議不要在到期(qi)日期(qi)之(zhi)(zhi)后(hou)(hou)使用(yong)。在此期(qi)間之(zhi)(zhi)后(hou)(hou)，污染(ran)的風(feng)險(xian)會增加，并且可能(neng)會發生輕微的功能(neng)喪失(shi)。

作用機(ji)理

巨(ju)(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)免疫和(he)(he)非免疫防御(yu)機制(zhi)中(zhong)起重要作(zuo)用(yong)。它(ta)們(men)是抵御(yu)滲(shen)透(tou)到脊椎動物體內的細(xi)(xi)菌，病毒和(he)(he)其他(ta)形(xing)式(shi)的微生物污染的首道防線。巨(ju)(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)是大型細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，幾乎存在(zai)于所(suo)有(you)身體組織中(zhong)，它(ta)們(men)可以具(ju)有(you)不同的形(xing)式(shi)和(he)(he)名(ming)稱（例如(ru)庫普弗(fu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，肺泡(pao)巨(ju)(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，小膠質(zhi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，破骨細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，紅髓巨(ju)(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)）。巨(ju)(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)“清除”，它(ta)們(men)攝入并消化可能是潛在(zai)病原體的所(suo)有(you)異物，微生物，癌(ai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)和(he)(he)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)碎片(pian)。該過(guo)程稱為吞(tun)噬(shi)(shi)(shi)作(zuo)用(yong)。巨(ju)(ju)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)主(zhu)要通過(guo)可溶性分(fen)子如(ru)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)因子和(he)(he)趨化因子的介導來進一步(bu)調節許多(duo)非吞(tun)噬(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的功能。他(ta)們(men)參與先天免疫，

脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)(ti)是人工制備的(de)球體(ti)(ti)，由同心(xin)磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)雙層組成(cheng)。當磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)分(fen)(fen)散在水(shui)(shui)中(zhong)(zhong)(zhong)時，親水(shui)(shui)性(xing)頭(tou)部(bu)(bu)將(jiang)構成(cheng)脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)(ti)的(de)兩個外部(bu)(bu)部(bu)(bu)分(fen)(fen)，而疏水(shui)(shui)性(xing)脂(zhi)(zhi)(zhi)肪酸(suan)基團將(jiang)構成(cheng)內(nei)部(bu)(bu)部(bu)(bu)分(fen)(fen)（見(jian)圖(tu)1）。水(shui)(shui)室分(fen)(fen)隔(ge)雙層，親水(shui)(shui)分(fen)(fen)子可以(yi)(yi)溶解(jie)在其(qi)中(zhong)(zhong)(zhong)，形成(cheng)脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)(ti)包(bao)封的(de)分(fen)(fen)子。氯(lv)膦酸(suan)鹽(yan)(yan)（二氯(lv)亞甲基雙膦酸(suan)酯或Cl2MBP）是一(yi)種親水(shui)(shui)性(xing)分(fen)(fen)子，可以(yi)(yi)封裝(zhuang)在磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)雙層中(zhong)(zhong)(zhong)。游離氯(lv)膦酸(suan)鹽(yan)(yan)不(bu)易穿(chuan)過細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)膜，并(bing)通過腎臟系統(tong)從循(xun)環中(zhong)(zhong)(zhong)迅速清除（即(ji)數分(fen)(fen)鐘內(nei)）。但是，氯(lv)膦酸(suan)鹽(yan)(yan)脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)(ti)包(bao)埋在脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)(ti)中(zhong)(zhong)(zhong)時，會被巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)吞噬(shi)，無法逃脫（見(jian)圖(tu)2）。磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)雙層被溶酶體(ti)(ti)磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)酶消(xiao)(xiao)化，而氯(lv)膦酸(suan)鹽(yan)(yan)未被消(xiao)(xiao)化并(bing)且保留在巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)中(zhong)(zhong)(zhong)。巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)攝入的(de)磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)雙層和脂(zhi)(zhi)(zhi)質體(ti)(ti)越多(duo)，在巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)內(nei)積累的(de)氯(lv)膦酸(suan)鹽(yan)(yan)越多(duo)。超過一(yi)定的(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)內(nei)濃度(du)，氯(lv)膦酸(suan)鹽(yan)(yan)將(jiang)通過啟動程序性(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)死亡（即(ji)凋亡）來(lai)消(xiao)(xiao)除巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)。

圖(tu)1.氯(lv)膦(lin)酸鹽脂(zhi)(zhi)質體(ti)的(de)(de)示意圖(tu)。囊(nang)泡由同心的(de)(de)磷脂(zhi)(zhi)雙層(ceng)構成，被(bei)水性(xing)隔室隔開。雙層(ceng)由親水和疏水基團組(zu)成。將(jiang)氯(lv)膦(lin)酸鹽（在(zai)此以(yi)黑色方塊表示）溶解在(zai)水溶液中(zhong)并封裝在(zai)脂(zhi)(zhi)質體(ti)內。

圖(tu)(tu)2.巨(ju)噬(shi)細胞(bao)對氯膦酸鹽脂質體(ti)的(de)攝取和消化示意圖(tu)(tu)。巨(ju)噬(shi)細胞(bao)通過胞(bao)吞作用攝入氯膦酸鹽脂質體(ti)，然后(hou)與含(han)有磷脂酶的(de)溶酶體(ti)（L）融合（箭頭）。磷脂酶破壞的(de)磷脂雙(shuang)層越(yue)(yue)多，在(zai)巨(ju)噬(shi)細胞(bao)內(nei)釋放的(de)氯膦酸鹽（黑色方塊）越(yue)(yue)多。巨(ju)噬(shi)細胞(bao)終通過凋亡被殺死。（N =巨(ju)噬(shi)細胞(bao)核）。

因此(ci)，氯(lv)膦(lin)酸(suan)鹽脂質體(ti)可(ke)用(yong)于通(tong)過(guo)消耗(hao)巨(ju)噬細(xi)(xi)(xi)胞(bao)來研究(jiu)巨(ju)噬細(xi)(xi)(xi)胞(bao)功能。例如，它們可(ke)以(yi)應用(yong)于各種自(zi)身免疫性疾(ji)病(bing)，移(yi)植，神經(jing)系統(tong)疾(ji)病(bing)和基因治(zhi)療(liao)的(de)(de)模型。氯(lv)膦(lin)酸(suan)鹽脂質體(ti)只(zhi)有在可(ke)以(yi)達到的(de)(de)情(qing)況下(xia)才能耗(hao)盡巨(ju)噬細(xi)(xi)(xi)胞(bao)。一(yi)些組織可(ke)以(yi)形成脂質體(ti)的(de)(de)屏障(zhang)。通(tong)過(guo)選擇氯(lv)膦(lin)酸(suan)鹽脂質體(ti)的(de)(de)正確給藥途徑，可(ke)以(yi)耗(hao)盡特定的(de)(de)器(qi)官或(huo)組織的(de)(de)巨(ju)噬細(xi)(xi)(xi)胞(bao)。有關管(guan)理協議的(de)(de)更多信(xin)息，請單擊此(ci)處(chu)。

PBS脂質(zhi)體主要用(yong)于對(dui)照(zhao)實(shi)驗。但是，這些(xie)也可(ke)以在某(mou)些(xie)時間段內通過飽和(he)來阻止吞噬作用(yong)。因此，PBS脂質(zhi)體不能代表(biao)正常健康(kang)的，未阻斷的，未抑制的和(he)未活化的巨噬細胞的對(dui)照(zhao)實(shi)驗。當比(bi)較氯(lv)膦酸鹽脂質(zhi)體和(he)PBS脂質(zhi)體的作用(yong)時，其作用(yong)因此可(ke)能小于預期。

有關更多信息，請參見：

– Van Rooijen，N.和Sanders，A.（1994）。脂(zhi)質(zhi)(zhi)體介導的巨噬細(xi)胞耗竭(jie)：作用(yong)機(ji)理，脂(zhi)質(zhi)(zhi)體制備和應(ying)用(yong)。免疫學雜志，174（1-2），83-93。

– Van Rooijen，N.，Sanders，A.和(he)van den Berg，TK（1996）。脂質體介(jie)導(dao)的氯膦酸鹽和(he)丙(bing)am的細(xi)胞(bao)內遞送誘(you)導(dao)的巨噬(shi)細(xi)胞(bao)凋亡。免疫學雜志，193（1），93-99。

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